細(xì)胞器標(biāo)志物抗體是細(xì)胞生物學(xué)中常用的研究工具。靶向特定的抗體有助于了解蛋白的亞細(xì)胞定位以及探究其生物功能,也可以在細(xì)胞器分離提取物的蛋白質(zhì)印跡分析中用作陽性對照。
纖毛(cilia)是由細(xì)胞游離面向外伸出的細(xì)長突起物。內(nèi)部是由微管組成的軸絲,外包有一層質(zhì)膜。纖毛長約5-10μm,直徑約0.2μm,其根部有一個致密顆粒,稱基體(basal body)。纖毛的主要功能是通過有節(jié)律的定向擺動,排出上皮表面的塵埃和細(xì)菌等物。根據(jù)結(jié)構(gòu)和功能,纖毛可分為運動纖毛和非運動纖毛(初級纖毛)兩大類。纖毛廣泛存在于真核生物中,具有運動、感知和信號傳導(dǎo)等多種生物學(xué)功能。
腺苷酸環(huán)化酶3(Adenylate Cyclase 3,ADCY3)是腺苷酸環(huán)化酶家族的重要成員,主要負(fù)責(zé)催化ATP生成環(huán)磷酸腺苷(cAMP),是細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)的關(guān)鍵酶。ADCY3在多種細(xì)胞和組織中廣泛表達,尤其是在嗅覺系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中具有重要作用。它被認(rèn)為是嗅覺纖毛和初級纖毛的標(biāo)記物,參與嗅覺信號傳導(dǎo)和神經(jīng)發(fā)育。此外,ADCY3在肥胖等代謝性疾病中也表現(xiàn)出重要的調(diào)控功能。
圖1 ADCY3抗體蛋白質(zhì)印跡分析結(jié)果圖
(貨號:K006946P)
RAB23是Ras致癌基因家族的一種小GTP酶,位于染色體6p12.1,最早于1994年從小鼠腦組織中分離得到。RAB23在細(xì)胞內(nèi)膜運輸、囊泡運輸及蛋白轉(zhuǎn)運等過程中發(fā)揮重要作用,其功能缺失性突變與多種先天性疾病的發(fā)病機制密切相關(guān)。此外,RAB23是Hedgehog(Hh)信號通路的負(fù)調(diào)控因子,在胚胎發(fā)育過程中對神經(jīng)管背側(cè)發(fā)育起重要作用。
圖2 RAB23抗體免疫組化結(jié)果圖
(貨號:K007342P)
IFT20是纖毛內(nèi)運輸(Intraflagellar transport,IFT)系統(tǒng)中最小的亞基,定位在內(nèi)膜系統(tǒng)的中心——高爾基體,參與纖毛蛋白從高爾基體到纖毛基部的運輸。在纖毛基部,IFT20被整合到IFT復(fù)合物中,負(fù)責(zé)纖毛內(nèi)貨物的雙向運輸,從而維持纖毛的結(jié)構(gòu)和功能。此外,IFT20還能通過調(diào)控酸性水解酶的溶酶體靶向,進而影響溶酶體的生物發(fā)生和功能。
圖3 IFT20抗體蛋白質(zhì)印跡分析結(jié)果圖
(貨號:K108201P)
已有一些蛋白被鑒定可用作纖毛標(biāo)志物(見表1)。