蛋白Marker試劑是生物學(xué)常用的試劑之一,不僅可以用于直觀地監(jiān)測(cè)電泳的進(jìn)程,評(píng)估PVDF、尼龍和纖維素膜的轉(zhuǎn)移效率、還可以用于計(jì)量蛋白質(zhì)的大致分子量。
Marker是一些純化好的蛋白混合物,通過與染料共價(jià)耦聯(lián),在電泳過程中或者轉(zhuǎn)膜時(shí)可以直接觀察到。預(yù)染蛋白分子量的出現(xiàn)方便了實(shí)驗(yàn),可以幫助我們?cè)陔娪緯r(shí)、電泳后以及轉(zhuǎn)膜后監(jiān)測(cè)電泳情況和估計(jì)遷移率。
由于預(yù)染蛋白Marker是與染料共價(jià)耦聯(lián),所以在不同的緩沖條件下電泳時(shí)遷移特性可能會(huì)發(fā)生某些變化,可能導(dǎo)致一些偏差,所以不太適合定位蛋白。
不過多數(shù)情況下Marker的條帶未必能和我們的目標(biāo)蛋白*一樣,我們得到的也不過是一種相對(duì)蛋白Marker試劑指示的參考大小,需要Western來定性,所以如果不是要區(qū)分大小相近的條帶,預(yù)染Marker還是很好用的,而且也可以和未染色的蛋白標(biāo)準(zhǔn)一起使用。
蛋白Marker試劑特點(diǎn):
1、使用方便:可在冷水或熱水中快速溶解,可直接上樣,無需加熱或者煮沸;
2、與各種膜兼容:彩色條帶在WB中可轉(zhuǎn)移到膜上成像;
3、更清晰,更易觀察;
4、每批次均經(jīng)過SDS-PAGE和WB驗(yàn)證,質(zhì)量更有保證;
5、足夠耐用:一只500ul至少跑100塊8*10cm膠。